與自動(dòng)化已經(jīng)是現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)檢測(cè)儀器的潮流,二手液相色譜儀便可滿足這樣的需求與期望。您對(duì)液相有一個(gè)系統(tǒng)的了解嗎,或許有部分人還不太清楚,那么,現(xiàn)在京科瑞達(dá)二手儀器為您整理了關(guān)于二手液相色譜儀知識(shí)匯總文章,希望對(duì)您有所幫助。
液相色譜儀主要由色譜泵及控制器、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理及控制五大部分組成,分離原理是一個(gè)物理過程,流動(dòng)相攜帶著待分析化合物和其他一些共存物質(zhì)流過色譜柱,利用不同物質(zhì)在固定相上的保留時(shí)間不同,從而出峰時(shí)間不同而達(dá)到分離,利用保留時(shí)間定性,峰高或者峰面積定量,在將分離后的各個(gè)成分依次通過一紫外檢測(cè)器時(shí)就可檢測(cè)出各化合物的濃度來(lái)。
1、高壓:流動(dòng)相為液體,流經(jīng)色譜柱時(shí),受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,應(yīng)對(duì)載液加高壓。
2、:分離效能高。可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到*分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
3、高靈敏度:紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng,進(jìn)樣量在μL數(shù)量級(jí)。
4、應(yīng)用范圍廣:百分之七十以上的有機(jī)化合物可用液相色譜分析,特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析,顯示出優(yōu)勢(shì)。
5、分析速度快、載液流速快:較經(jīng)典液體色譜法速度快得多,通常分析一個(gè)樣品在15~30 min,有些樣品甚至在5min內(nèi)即可完成,一般小于1h。此外HPLC還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn)。
根據(jù)分離原理的不同,液相色譜法可分為以下幾種主要類型:液-液分配色譜法(LLC)﹑化學(xué)健合相色譜法﹑液-固吸附色譜法﹑離子交換色譜法﹑空間排阻色譜法等。
1、液-液分配色譜法(LLC)是基于樣品組分中溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間的相對(duì)溶解度的不同而使組分在兩相之間分配系數(shù)不同,進(jìn)而分離的過程。
2、化學(xué)健合相色譜法是把固定液的有機(jī)基團(tuán)通過化學(xué)反應(yīng)鍵合在擔(dān)體的表面上,從而克服固定液流失的現(xiàn)象,以達(dá)到分離的目的。
3、液-固吸附色譜法是根據(jù)樣品中各組分吸附作用的不同而實(shí)現(xiàn)彼此分離的過程。
4、離子交換色譜法是利用離子交換原理與液相色譜技術(shù)結(jié)合的方法來(lái)測(cè)定溶液中陽(yáng)離子和陰離子的。
5、空間排阻色譜法是把具有化學(xué)惰性的多孔物質(zhì)作為固定相,使樣品組分受固定相孔徑大小的影響,將不同體積的分子進(jìn)行分離的過程。
液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。
與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,HPLC所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離。
HPLC成為解決生化分析問題zui有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無(wú)機(jī)分析等各種領(lǐng)域。液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。
在食品生產(chǎn)加工過程中,往往還會(huì)添加防腐劑﹑色素﹑甜味劑﹑保鮮劑等化學(xué)物質(zhì)。它們的含量過高也將引起人類的健康問題。此外,由于我們所處環(huán)境的日益惡化,也會(huì)使食品沾染有害的微量元素來(lái)危害我們的身體健康。因此,液相色譜在食品分析中起到重大作用。
1、在食品中調(diào)味品的分析
液相色譜法也可以被用于食物調(diào)味品的分離分析。如J.D.BARANOWSKI報(bào)導(dǎo)了利用液相色譜法分離生姜辣味成分的方法。又如Bbathnanathic M和BuckleH.A報(bào)導(dǎo)了使用液相色譜法測(cè)定胡椒中胡椒堿含量的方法。
2、食品中有機(jī)酸的分離
食品中的有機(jī)酸是食品中酸味的主要來(lái)源,食品中有機(jī)酸的種類含量與構(gòu)成對(duì)食品的味道有很大的影響。因此食品中有機(jī)酸的定性與定量分析不僅對(duì)食品營(yíng)養(yǎng)研究意義重大,而且在食品生產(chǎn)過程的質(zhì)量管理中也*。HPLC應(yīng)用于有機(jī)酸的測(cè)定時(shí),要先將食品樣品勻漿提取離心后,樣液經(jīng)0.3um濾膜抽濾,以(NH4)2HPO4—H3PO4緩沖液(pH=2.7)為流動(dòng)相,用液相色譜法在C18色譜柱上分離,在波長(zhǎng)210nm處經(jīng)紫外檢測(cè)器檢測(cè),用峰高或峰面積表示的標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定有機(jī)酸的含量。
3、食品中添加劑的分析
食品添加劑不僅種類繁多,功能各異,而且分類沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。因此,對(duì)添加劑的測(cè)定就提出了更加艱巨的要求。食品添加劑的測(cè)定同其他分析一樣,首先要將其從復(fù)雜的混合物中分離出來(lái),分離后再針對(duì)待測(cè)物質(zhì)的物理﹑化學(xué)性質(zhì)的不同來(lái)選擇適當(dāng)?shù)姆治龇椒?。液相色譜在食品添加劑中的應(yīng)用,不僅可以提高食品的質(zhì)量以及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,而且可以改善食品給我們帶來(lái)的感觀性質(zhì)。食品添加劑可以防止食品變質(zhì),提高保藏期限,給我們提供美味的口感。我們可以用液相色譜法對(duì)甜味劑中糖精鈉的含量進(jìn)行測(cè)定。制備糖精鈉的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和糖精鈉的標(biāo)準(zhǔn)使用液,將樣品微熱攪拌,并加入氨水(1+1)調(diào)試pH=7,以甲醇-乙酸銨溶液(0.02mol/L)(5+95)作為流動(dòng)相制備色譜柱,取樣品處理液和標(biāo)準(zhǔn)使用液各10uL,注入液相色譜儀進(jìn)行分離,以標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間為依據(jù)進(jìn)行測(cè)定,以其峰面積求出樣液中被測(cè)物質(zhì)的含量。
4、食品中糖類的分離分析
淀粉是一種多糖,它廣泛存在于植物的根﹑莖﹑葉﹑種子等組織中,是人類食物的重要組成部分,同時(shí)也是供給人體熱量的主要來(lái)源。淀粉是由葡萄糖單位構(gòu)成的聚合體,其水解產(chǎn)物為單糖。我們可以用液相色譜法對(duì)小麥淀粉的水解產(chǎn)物進(jìn)行分析。
5、食品中維生素的分離分析
維生素是人和動(dòng)物為維持正常的生理功能而需從食物中獲得的一類微量有機(jī)物,在人體的生長(zhǎng)代謝和發(fā)育過程中發(fā)揮著重要的作用。在測(cè)定脂溶性維生素時(shí),通常要先用皂化法處理樣品,用水洗去除類脂物,然后用有機(jī)溶劑提取脂溶性維生素,濃縮后溶于適當(dāng)?shù)娜軇┖鬁y(cè)定。
6、在其他食品分析中的應(yīng)用
HLPC不僅僅是應(yīng)用在以上領(lǐng)域,還可以廣泛用于食品藥品殘量的檢測(cè),食品中違禁成分的檢測(cè)以及食品中營(yíng)養(yǎng)成分的分離與分析。彭錦峰建立了用液相色譜測(cè)定食用香菇中甲醛的方法。王帆等鍵立了用液相色譜檢測(cè)保健食品中大豆異黃酮的方法。這些方法的研究和實(shí)驗(yàn),使液相色譜在食品中的應(yīng)用得以發(fā)展,為日后液相色譜在食品分離與分析中的廣泛應(yīng)用提供了依據(jù)。
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